Микробиологический контроль воздуха

Санитарно-микробиологическое исследование воздуха позволяет выявить инфекционных агентов, плесень, бактерии, грибковые споры. Для этой цели проводится отбор проб, их дальнейшая обработка и транспортировка. Выполняется посев, культивирование микробов и иные мероприятия, необходимые для анализа дыхательной среды. Это позволяет бороться с аэрогенными инфекциями, требуется при выполнении очистки от бактериальных загрязнений. Объектом исследования становится воздух, полученный в промышленных районах, в общеобразовательных учреждениях, больницах, на производстве.

Этапы проведения анализа

Санитарно-микробиологическое исследование необходимо для анализа воздуха как внутри зданий, так и на объектах внешней среды. Данная процедура проводится в 4 этапа:

1. Выполняется правильный отбор проб.
2. Пробы подвергаются обработке, затем транспортируются и хранятся в определенных условиях. Также данный этап включает в себя концентрирование возбудителей.
3. Проводится бактериологический посев, а также культивирование микроорганизмов.
4. Завершающий этап – это идентификация выделенных микроорганизмов.

Микробиологическое исследование воздуха подразумевает определение количества стафилококков, сапрофитных бактерий, стрептококков. Также удается выявить грибковые споры, плесень и различных инфекционных агентов.

Отбор проб – это один из наиболее важных этапов, который должен проводиться с учетом установленных правил. Важно не допустить ошибок, чтобы результат исследования был точным. Внутри здания точки отбора определяются по следующему принципу: одна точка приходится на 20 кв.м. Также берут пробы по типу конверта: 4 точки находятся по углам помещения, а пятая – в центре.

Пробы следует брать на расстоянии 1,6 м от поверхности пола. Процедура проводится в дневное время, когда у людей наблюдается наибольшая активность. Предварительно следует проветрить комнату и провести очищение поверхностей с использованием воды.

Воздух на открытых объектах принято анализировать в зоне размещения жилых строений. Берут его на уровне от 50 до 200 см от почвы. Пробы необходимо взять недалеко от объектов загрязнения, а также в садах и парках, чтобы понять, как они влияют на микрофлору.

Порядок проведения отбора проб

Методы санитарно-бактериологического исследования воздуха имеют свои преимущества. Отдельно следует рассмотреть варианты отбора материала для оценки. Их можно поделить на два вида: седиментационный и аспирационный. Первый появился значительно раньше, он отличается доступностью и лёгкостью.

Седиментационный вид распространен, но он не считается точным. Данный способ появился благодаря Р. Коху, немецкому биологу. Воздух будет оседать в открытые лабораторные емкости. Их ставят в тех точках, которые были определены для проб. Ёмкости с мясо-пептонным бульоном и агаром не закрывают около 5 минут, но этот показатель может меняться. Время определяется с учетом интенсивности загрязнения. Чтобы определить количество санитарно-показательных микробов, используется среда Туржецкого или Гарро, ЖСА, среда Сабуро.

После прекращения экспозиции ёмкости необходимо закрыть и отправить в термостат, чтобы провести культивирование в подходящей среде. Иногда их держат двое суток при 18–24°С, чтобы образовался пигмент пигментообразующими микробами.

У седиментационного метода можно выделить определённые минусы:

• на субстратах способна вырасти лишь часть микрофлоры;
• на питательную поверхность способны осесть исключительно грубодисперсные фракции аэрозоля.

Данный метод не подходит для определения степени бактериальной загрязненности воздуха на открытой территории.

Аспирационные способы отбора проб считаются более совершенными. Может использоваться буфер ионов водорода, мясо-пептонный бульон. Для взятия проб применяются различные приборы, например ПОВ-1, БВЭП-1 ПУ-1Б. Чтобы исследовать атмосферу, могут понадобиться мембранные фильтры №4. Сквозь них воздух будет просасываться благодаря аппарату Зейтца. Так как приборов много, это указывает на то, что на данный момент нет универсального аппарата.

Отдельно рекомендуется рассмотреть аппарат ПУ-1Б. Оно необходим для проведения микробиологического анализа воздуха. Данный прибор часто используется, когда нужно исследовать воздух внутри зданий. Им располагают лаборатории санэпидемстанции.

Воздух в данном приборе будет просасываться сквозь отверстия, расположенные на крышке. Он ударится о субстрат, пыль и аэрозоль прилипнут к среде, а с ними организмы, которые есть в воздухе. Чашку Петри закрепят на вращающейся части аппарата. Это позволит бактериям равномерно распределиться по субстрату. Данное устройство для работы требует подключения к сети. Чашку достанут после отбора пробы, накроют крышкой и отправят на двое суток в термостат. Отбор выполняют со скоростью 200 л в минуту, но не дольше 5 минут.

Прибор ПАБ-1 на данный момент не производится. Частицы будут внутри прибора получать электрозаряд, затем они осядут на электродах. Также используются чашки Петри с твёрдыми или жидкими субстратами. Они размещаются на металлических поддонах. Прибор отличается высокой производительностью – до 250 л в минуту. Он рекомендован к применению в тех ситуациях, когда требуется в крупном объеме брать воздух для исследования микрофлоры. Обычно процедура проводится, если обнаруживаются болезнетворные организмы. Допустим, в помещениях клиник выявляют возбудителей инфекций, поражающих пациентов.

Данные приборы позволяют узнать примерные результаты, и оценка зараженности воздуха оказывается более точной, если сравнивать с седиментационным методом. Для отбора удастся воспользоваться любым прибором для определения патогенных микроорганизмов воздуха. Нередко отбор совмещается со следующим этапом – посевом.

Чтобы уменьшить количество микробов в воздухе внутри комнаты, можно воспользоваться следующими методами:

• физический – для обработки применяется облучение ультрафиолетом;
• химический – могут быть применены лактат, также используется двуокись азота или озон;
• механический – воздух будет пропущен сквозь особые фильтры.

Как определяется общее количество сапрофитных бактерий

Микробное число является суммарным количеством микробов, присутствующих в 1 кубометре воздуха. Чтобы узнать общее количество бактерий в комнате, необходимо взять 2 пробы на ёмкости с МПА. Для этого применяется аппарат Пу-1Б. Также можно использовать седиментационный метод – лабораторные сосуды с субстратом устанавливают в 4 углах комнаты и посредине.

Чаши будут отправлены в термостат на день, потом их 2 суток подержат при температуре около 20–22°С. Экспозиция чашек с посевами на свету позволит провести раздельный подсчет числа пигментных колоний, а также количество лучистых грибов, палочковых бактерий.

Проведя подсчет в 2 чашках, необходимо будет вычислить среднее значение и выполнить перерасчет на число микроорганизмов в 1 кубометре воздуха. Число каждой из групп будет выражено в процентном соотношении с общим числом. Чтобы определить микробное число, понадобится способом Коха подсчитать колонии, которые выросли на МПА в лабораторном сосуде для культивирования клеток.

Определение стафилококков

Санитарно-микробиологический контроль воздуха также требует определения количества стафилококков. Они являются самыми распространенными организмами в дыхательной среде внутри зданий. Они отличаются высокой устойчивостью к разным отрицательным факторам.

Пробы отбирают по 250 л на 2–3 чашки с ЖСА, а также на чашу со средой, содержащей кровь животных. Чашки необходимо инкубировать при температурном показателе 37°С на протяжении 2 суток.

Определение стрептококков

Грамположительные кокки попадают в воздух от носителей, а также от больных тонзиллитом, скарлатиной. Отбор выполняют на чашке со средами Туржецкого и Гарро. Необходимо выполнить забор 250 л воздуха.

Чашки держат в термостате до суток. Потом на 2 дня оставляют при температурном показателе около 18–22°С. Идентификация выполняются по стандартной методике.

Определение патогенных микробов

Патогенных микробов тяжело выделить, так как их концентрация внутри зданий небольшая. Когда выполняют расшифровку внутрибольничных инфекций, в воздухе выявляют присутствие различных бактерий. Понадобится проба воздуха в объёме от 1000 л. Посев выполняют на подходящие среды для определенных видов микробов.

Когда приходится выполнять проверку воздуха на присутствие микобактерий туберкулёза, выполняется отбор до 500 л воздуха. Используется среда Школьниковой, её потом подвергают обработке 3% раствором серной кислоты, чтобы подавить других микробов. Затем пробирки инкубируют до 3 месяцев и проверяют их с определённой периодичностью.

Так как развивается микробиологическая сфера, важно проводить проверку дыхательной среды на присутствие грибов-продуцентов при изготовлении антибактериальных средств, дрожжей, некоторых препаратов. Воздух проверяют на плесень, для анализа требуется до 1000 л воздуха на емкости со средой Чапека.

Проводится инкубация при определённых условиях, затем выполняют идентификацию. Важно, чтобы дрожжеподобных грибов оказалось не более 600 клеток в 1 кубометре воздуха в производственном пространстве, иначе у сотрудников может развиться аллергия.