Russian
Arabic
Chinese (Simplified)
Dutch
English
French
German
Italian
Portuguese
Spanish
Процесс лабораторного анализа связан с некоторыми элементарными условиями, вытекающими из самой сущности этого процесса. Понятно, что в процессе лабораторного исследования анализируемый образец биоматериала должен быть отделен от других образцов. Из общего объема образца должны быть взяты строго определенные доли для участия в отдельных видах количественных исследований. Применяемые при анализе реагенты используются также в строго определенных дозах, что невозможно без точного отделения этих доз от остальной массы реагента. Процесс взаимодействия реагентов с образцом должен происходить изолированно от других образцов. Наиболее полное взаимодействие реагентов с образцом и его компонентами происходит в их жидком состоянии, т.е. в растворенном виде. Отсюда вытекает необходимость выполнения в каждой лаборатории некоторых элементарных процедур и использования для этих процедур соответствующих устройств, составляющих элементарное лабораторное оборудование.
К числу таких процедур относятся взвешивание навесок реагентов и приготовление растворов, а устройствами, обеспечивающими выполнение этих процедур, являются различные предметы лабораторной посуды, весы и дозаторы. Хотя эти устройства и предназначены для выполнения элементарных процедур, современный технический прогресс привел к созданию достаточно эффективных вариантов этого оборудования, способных существенно повысить точность и удобство лабораторной работы.
Лабораторная посуда.
Лабораторная посуда представляет собой емкости различной формы и объема, используемые для сбора образцов биоматериалов, для размещения аликвот (проб) биоматериалов и растворов реагентов, для проведения процедур пробоподготовки (термостатирование, центрифугирование), для проведения аналитических процедур. Существует обширная номенклатура этих изделий, выбор из которой необходимого лаборатории ассортимента определяется профилем выполняемых ею исследований:
— Бутыли, флаконы и виалы;
— Колбы конические и сферические узкогорлые;
— Пробирки многоцелевые;
— Пробирки вакуумные;
— Пробирки центрифужные и микроцентрифужные;
— Пипетки для перенесения жидкости и мерные;
— Микропипетки;
— Капилляры;
— Многолуночные и глубоколуночные планшеты;
— Предметные и покровные стекла;
— Кюветы для измерительных приборов.(рис. 22)
Широко распространенным предметом лабораторной посуды является пипетка, однако она скорее служит средством отмеривания растворов (см. ниже).
Лабораторная посуда может быть многоразового и одноразового использования. Одноразовая посуда (большей частью изготавливаемая из пластмассы)предоставляет значительные удобства при ее использовании и дает экономию времени, так как не нуждается в мытье. Ряд фирм на российском рынке предлагает пробирки, предназначенные для ускоренного взятия крови: Vacutainer с замком Hemogard (фирма «Cormay»), S- Monovette для взятия венозной крови и Microvette для взятия капиллярной крови (фирма «Sarstedt»), Vacuette для венозной крови и MiniCollect для капиллярной крови(производитель » Greiner labortechnik», Apexlab апекслаб). Эти пробирки закрыты резиновыми колпачками, воздух в них разрежен, что позволяет, использовав специальные двусторонние иглы, введя один конец иглы в вену, другим ее концом пройти резиновую мембрану.
При этом разреженная атмосфера внутри пробирки побуждает кровь из вены быстро изливаться в пробирку, что значительно сокращает время пережатия вены жгутом и ограничивает отрицательные влияния этого пережатия на содержание ряда аналитов и, тем самым, на результаты лабораторного исследования. Некоторые устройства (например, S-Monovette) позволяют на выбор осуществлять как аспирационный, так и вакуумный способ взятия крови. Выпускаются также пробирки с консервантами, антикоагулянтами, разделительным гелем что, значительно облегчает работу персонала и улучшает аналитические результаты. Эти пробирки могут использоваться в процессе анализа (рис. 23).
Многоразовую посуду (большей частью стеклянную), в которой выполняются анализы, — пробирки или контейнеры — следует надписывать только специальным фломастером, а не карандашом по стеклу, так как такие надписи потом трудно удалить, кроме того, карандаш по стеклу при нагревании расползается и надпись теряется. Надписывать пробирки или колбы можно и обычным мягким графитовым карандашом, предварительно обработав участок поверхности посуды наждачной бумагой. Надпись с образовавшейся матовой поверхности легко удаляется обычной резинкой. При наличии в лаборатории оборудования для печатания и считывания штрихового кода вместо надписей используют наклейки с кодом, соответствующим пробе определенного пациента или определенному реактиву.
При многоразовом использовании лабораторной посуды она должна быть чисто вымыта, причем для разных исследований требования к чистоте посуды и, следовательно, способы мытья неодинаковы. Наиболее широко распространена обработка стеклянной посуды хромовой смесью (хромпиком). Для ее приготовления в большую фарфоровую ступку насыпают кристаллы бихромата калия (К2Сг207) и растирают с концентрированной серной кислотой, постепенно увеличивая ее количество так, чтобы раствор был насыщенным. Смесь должна иметь красноватый оттенок и нагреваться, если ее налить в мокрую посуду. Когда хромпик приобретает зеленый цвет и перестает нагреваться, это будет означать, что его способность к окислению органических соединений исчерпана, в связи с чем он не может более применяться для мытья посуды. Хромовую смесь наливают в колбы, цилиндры и т.д. или погружают в нее более мелкие предметы — пипетки, флакончики и т.п. Перед тем как обрабатывать посуду хромпиком, нужно тщательно удалить все видимые на глаз загрязнения, в том числе надписи карандашом по стеклу. В противном случае хромовая смесь быстро портится, но, главное, при взаимодействии с органическим веществом могут образоваться ядовитые пары и выделяться тепло, что таит в себе опасность взрыва.
Хромовая смесь — очень едкий реактив: он прожигает одежду, а попадая на кожу, вызывает ожоги. Поэтому, если возможно, лучше пользоваться менее едкими средствами — содой, мылом, стиральным порошком. Если посуду моют, погружая ее в моющие растворы, то сначала нужно удалить грязь и надписи с внешней поверхности и вымыть ее теплой водой с мылом; если надписи сделаны стеклографом (карандашом по стеклу), их удаляют ватой, смоченной в органическом растворителе (хлороформ, эфир и т.п.). Грязь на внешней поверхности не только портит моющие растворы, но и может попасть с ними на внутреннюю поверхность посуды.
Каждый способ мытья посуды имеет свои преимущества и недостатки; он должен быть адекватен тому виду анализа, для выполнения которого посуда предназначается. Поэтому желательно всегда использовать один и тот же комплект посуды. Мытье хромпиком обеспечивает степень чистоты, достаточную практически для всех видов лабораторных клинических работ, но этот способ трудоемок и требует соблюдения мер предосторожности. Стиральные порошки безопаснее и работать с ними проще, но надо иметь в виду, что они прочно адсорбируются на стекле и могут быть удалены только при многократном промывании посуды водой. Для каждого вида анализов нужно разработать адекватный — не слишком трудоемкий, но достаточно надежный метод мытья посуды, убедиться, что он не искажает результаты исследований и всегда пользоваться одним и тем же моющим средством.Однозначные советы дать трудно, так как поступающие в продажу стиральные порошки помимо основного детергента — алкилсульфоновых кислот — содержат различные добавки, а разные сорта стекла по-разному выщелачиваются и адсорбируют моющие средства.
Следует постоянно заботиться также о чистоте той посуды, которую не моют перед каждым анализом (пипетки и флаконы для реактивов). Иногда вновь приготовленную порцию реактива наливают во флакон, в котором еще сохранились остатки предыдущей порции этого же реактива, но, как правило, остатки выливают и флакон моют с хромпиком. Это приходится делать потому, что существует угроза развития грибов и микробов, для которых многие реактивы оказываются подходящей средой. Мытье флаконов с хромпиком и высушивание в горячем сушильном шкафу хотя и не обеспечивает полную стерильность, но значительно уменьшает микробную обсемененность и способствует лучшей сохранности реактивов. То же относится и к пипеткам, которыми реактивы отмеривают.
В лабораториях, где приходится мыть много посуды, удобно пользоваться лабораторными посудомоечными машинами, в которых используется ультразвуковая очистка поверхностей. Если в загрязненной посуде был или мог быть инфицированный биологический материал, она перед тем, как закладываться в моечную машину, должна быть стерилизована согласно санитарным правилам работы с соответствующим материалом. Лабораторная посудомоечная машина имеет ванну с крышкой, обычно объемом 3-10 л, в которую заливают моечный раствор и кладут посуду, она обрабатывается ультразвуком при температуре до 60°С, после чего промывается чистой водой.
До пятидесятых годов вся лабораторная посуда готовилась только из стекла или фарфора, в редких случаях из металла. С тех пор стали широко использовать пластмассы — сначала полиэтилен, затем и другие, с самыми разными свойствами: из прозрачной (пропускающей свет вплоть до ультрафиолетовой области) готовят оптические кюветы, из поглощающей сине-фиолетовую часть спектра — посуду для чувствительных к свету реактивов. Из пластмассы изготовляются также контейнеры для проб биологического материала, пробирки, наконечники для пипеток, сосуды для выращивания культур и т.д. Преимущество пластмассы перед стеклом очевидны — она не бьется, легче, дешевле. Для каждого вида лабораторной работы удается подобрать соответствующий сорт пластмассы, которая допускает, например, температурную стерилизацию или задерживает свертывание крови. Планируя работу, надо ясно представлять себе свойства посуды, которая будет использоваться непосредственно в анализе и для хранения реактивов.
Образцы проб или реактивы соприкасаются только с внутренней поверхностью сосуда, поэтому в ряде случаев ее стенки делаются двуслойными: внутреннее покрытие обеспечивает химическую или биологическую инертность, внешний слой — механическую прочность. При мытье такой посуды надо соблюдать осторожность, чтобы не нарушить внутреннее покрытие, которое может быть также повреждено агрессивной жидкостью. В ряде случаев поврежденное внутреннее покрытие может быть восстановлено (рециклизовано). В таблице 1 приведены свойства некоторых видов пластмасс, используемых в лабораторной работе. Надо иметь в виду, что химическое, техническое и коммерческое название qflHoft и той же пластмассы могут различаться, соответствующую информацию надо искать в каталоге, либо в справочнике.
Лабораторная посуда нуждается в стерилизации — иногда перед работой и почти всегда после работы, поскольку всякий поступивший для исследования биологический материал должен рассматриваться как инфицированный. Большинство видов пластмасс выдерживает действие основных антисептиков: четвертичных аммониев, формалина, этанола, йода, окислителей, но длительное действие агрессивных веществ может сказаться на посуде из полиуретана, полистирола, поликарбоната и акри-ла.
Стерилизацию автоклавированием проводят обычно при 121°С и избыточном давлении в 1 атмосферу, при этом надо иметь в виду, что пластмассы плохо проводят тепло, поэтому большие объемы (свыше 1 л)
